Specifični koraci ćelijske kulture

1. Zajednička oprema

1. Oprema u prostoriji za pripremu

Pojedinačni destilator destilovane vode, destilator dvostruke destilovane vode, rezervoar za kiselinu, pećnica, ekspres lonac, ormar za skladištenje (čuvanje nesterilizovanih artikala), orman za skladištenje (čuvanje sterilizovanih artikala), sto za pakovanje.Oprema u prostoriji za pripremu rastvora: torziona vaga i elektronska vaga (medicina za vaganje), PH metar (merenje pH vrednosti rastvora kulture), magnetna mešalica (konfigurisanje sobe za rastvor za mešanje rastvora).

2. Opremanje prostorije kulture

Rezervoar za tečni azot, ormar za skladištenje (čuvanje sitnica), fluorescentna i ultraljubičasta lampa, sistem za prečišćavanje vazduha, frižider na niskoj temperaturi (- 80 ℃), klima uređaj, boca sa ugljen-dioksidom, pomoćni sto (pisanje testnih zapisa).

3. Oprema koja se mora postaviti u sterilnu prostoriju

Centrifuga (sakupljanje ćelija), ultra čist radni sto, invertirani mikroskop, CO2 inkubator (kultura za inkubiranje), vodeno kupatilo, mašina za dezinfekciju i sterilizaciju sa tri kiseonika, frižider na 4 ℃ (postavljanje seruma i rastvora kulture).

2、 Aseptični rad

（1） Sterilizacija sterilne sobe

1. Redovno čistite sterilnu prostoriju: jednom sedmično prvo koristite vodu iz slavine za brisanje poda, obrišite sto i očistite radni sto, a zatim koristite 3 ‰ lizola ili bromogeramina ili 0,5% peroctene kiseline za brisanje.

2. Sterilizacija CO2 inkubatora (inkubatora): prvo obrišite sa 3 ‰ bromogeramina, zatim obrišite sa 75% alkohola ili 0,5% persirćetne kiseline, a zatim zračite ultraljubičastom lampom.

3. Sterilizacija pre eksperimenta: uključite ultraljubičastu lampu, sterilizator sa tri kiseonika i sistem za pročišćavanje vazduha na 20-30 minuta.

4. Sterilizacija nakon eksperimenta: obrišite ultra-čist sto, pomoćni sto i obrnuti mikroskop sa 75% alkohola (3 ‰ bromogeramina).

Priprema laboratorijskog osoblja za sterilizaciju

1. Operite ruke sapunom.

2. Nosite izolacionu odeću, izolacione kape, maske i papuče.

3. Obrišite ruke vatom sa 75% alkohola.

Demonstracija sterilne operacije

1. Sve boce alkohola, PBS-a, podloge za kulturu i tripsina unesene u ultra-čistu radnu površinu treba obrisati sa 75% alkohola na vanjskoj površini boce.

2. Radite u blizini plamena alkoholne lampe.

3. Pribor se mora sterilizirati prije upotrebe.

4. Pribor (kao što su čepovi za flaše i kapaljke) koji se i dalje koristi treba da bude postavljen na visokom mestu i da se i dalje pregreva tokom upotrebe.

5. Sve radnje treba da budu blizu alkoholne lampe, a radnja treba da bude lagana i tačna, i ne treba da se dodiruje nasumično.Ako slama ne može da dodirne rezervoar za otpadnu tečnost.

6. Kada usisavate više od dvije vrste tečnosti, obratite pažnju na zamjenu usisne cijevi kako biste spriječili unakrsnu kontaminaciju.

Pogledajte sljedeće poglavlje za dezinfekciju instrumenata.