Nekoliko enzima koji se obično koriste u PCR eksperimentima

Lančana reakcija polimeraze, skraćeno kaoPCRna engleskom, je tehnika molekularne biologije koja se koristi za amplifikaciju specifičnih fragmenata DNK.Može se smatrati posebnom replikacijom DNK izvan tijela, koja može uvelike povećati vrlo malu količinu DNK.Tokom čitavogPCRu procesu reakcije, jedna klasa supstanci igra vitalnu ulogu – enzimi.

1. Taq DNK

U eksperimentima u ranim danimaPCR, naučnici su koristili DNK polimerazu I Escherichia coli, ali postoji problem sa ovim enzimom: potrebno je da dopuni novi enzim svaki put kada se ciklus izvodi, što čini korake operacije malo komplikovanim i teško ga je potpuno automatski pojačati.Ovaj problem je rešen nakon što su naučnici 1988. godine slučajno izolovali Taq DNK polimerazu iz Thermus aquaticus. Od tada je automatska amplifikacija DNK postala stvarnost.Otkriće ovog enzima također činiPCRtehnologija pogodna, praktična i univerzalna tehnologija.Trenutno je Taq DNK polimeraza najčešća polimeraza u DNK kompletima.

2. PfuDNA

Kao što je gore spomenuto, Taq DNase ima veliku grešku, pa su naučnici modificirali Taq DNK polimerazu do određene mjere kako bi izbjegli nespecifično pojačanje zbog nepodudaranja, što je rezultiralo netačnim rezultatima testa.Ali modifikacija Taq DNK polimeraze može inhibirati aktivnost DNK polimeraze na sobnoj temperaturi.PfuDNA polimeraza može dobro nadoknaditi gore navedene nedostatke Taq DNK polimeraze, tako da se PCR reakcija može izvesti normalno, a stopa uspjeha amplifikacije ciljnog gena može biti efikasno poboljšana.

3. Reverzna transkriptaza

Reverzna transkriptaza je otkrivena 1970. godine. Ovaj enzim koristi RNK kao šablon, dNTP kao supstrat, prati princip uparivanja baza i sintetiše jednu lancu DNK komplementarnu RNK šablonu u smjeru 5′-3′.Reverzna transkriptaza prvenstveno zavisi od aktivnosti DNK polimeraze iz DNK ili RNK šablona i stoga nema aktivnost 3′-5′ egzonukleaze.Međutim, ima aktivnost RNaze H, koja do određene mjere ograničava dužinu sinteze reverzne transkriptaze.Zbog niske vjernosti i termostabilnosti divlje reverzne transkriptaze, naučnici su je također modificirali.

ZaPCREksperimenti, glavni potrošni materijali su: pojedinačna PCR epruveta, 4/8 traka PCR epruveta, PCR ploče.

Labio'sPCR potrošni materijalimaju sljedećeprednosti:

PCR ploče: Široka kompatibilnost termalnog ciklusa;Visok kontrast, laka identifikacija bunara;dobra refleksija fluorescencije; dobraprijenos topline;Certificirani DNase, RNase, DNK, PCR inhibitori i testirani bez pirogena.

Pojedinačne PCR epruvete: Otporan na isparavanje; dobarprijenos topline;odlična optička jasnoća; sertifikovana Dnaza, RNaza, DNK, PCR inhibitori i testirani bez pirogena.

PCR epruvete od 4/8 traka: Ultra tanki zidovi; visoka jasnoća; dobra refleksija fluorescencije;može se koristiti u farmaceutskoj industriji, prehrambenoj industriji i molekularnoj biologiji; visokokvalitetni, djevičanski PP materijal; certificirani DNase, RNase, DNK, PCR inhibitori i testirani bez pirogena.