Uvod u uobičajene mikrobne kulture (I)

Uvod u uobičajene mikrobne kulture (I)

Podloga za kulturu je vrsta mješovite hranjive matrice umjetno pripremljene od različitih supstanci prema potrebama različitog mikrobnog rasta, koja se koristi za uzgoj ili odvajanje različitih mikroorganizama.Prema tome, hranjiva matrica treba sadržavati hranjive tvari (uključujući izvor ugljika, izvor dušika, energiju, neorgansku sol, faktore rasta) i vodu koju mogu koristiti mikroorganizmi.U zavisnosti od vrste mikroorganizama i svrhe eksperimenta, postoje različite vrste i metode pripreme podloga za uzgoj.

Neki uobičajeni mediji kulture u eksperimentu se uvode na sljedeći način:

Nutritivna agar podloga:

Hranljivi agar podloga se koristi za razmnožavanje i kulturu običnih bakterija, za određivanje ukupnog broja bakterija, očuvanje bakterijskih vrsta i čiste kulture.Glavni sastojci su: goveđi ekstrakt, ekstrakt kvasca, pepton, natrijum hlorid, agar u prahu, destilovana voda.Pepton i goveđi prah obezbeđuju izvore azota, vitamina, aminokiselina i ugljenika, natrijum hlorid može održavati uravnotežen osmotski pritisak, a agar je koagulant medijuma za kulturu.

Nutritivni agar je najosnovnija vrsta podloge za kulturu, koja sadrži većinu nutrijenata potrebnih za rast mikroba.Nutritivni agar se može koristiti za rutinsku kulturu bakterija.

Podloga za krvni agar:

Blood agar medij je vrsta peptona sa goveđim ekstraktom koji sadrži defibriniranu životinjsku krv (uglavnom krv zeca ili ovce).Stoga, pored različitih nutrijenata potrebnih za uzgoj bakterija, može osigurati i koenzim (kao što je faktor V), hem (faktor X) i druge posebne faktore rasta.Stoga se podloga hemokulture često koristi za kultivaciju, izolaciju i očuvanje određenih patogenih mikroorganizama koji su zahtjevni za ishranu.

Osim toga, krvni agar se obično koristi za test hemolize.Tokom procesa rasta, neke bakterije mogu proizvesti hemolizin za razbijanje i rastvaranje crvenih krvnih zrnaca.Kada narastu na krvnoj ploči, oko kolonije se mogu uočiti prozirni ili prozirni hemolitički prstenovi.Patogenost mnogih bakterija povezana je s hemolitičkim karakteristikama.Budući da je hemolizin koji proizvode različite bakterije različit, različit je i hemolitički kapacitet, a različit je i fenomen hemolize na krvnoj ploči.Stoga se test hemolize često koristi za identifikaciju bakterija.

TCBS medij:

TCBS je tiosulfat citratna žučna sol saharoza agar podloga.Za selektivnu izolaciju patogenog vibriona.Pepton i ekstrakt kvasca koriste se kao osnovne hranljive materije u medijumu kulture za obezbeđivanje izvora azota, ugljika, vitamina i drugih faktora rasta potrebnih za rast bakterija;Veća koncentracija natrijum hlorida može zadovoljiti potrebe halofilnog rasta vibriona;Saharoza kao izvor ugljika koji se može fermentirati;Natrijum citrat, alkalna sredina visokog pH i natrijum tiosulfat inhibiraju rast crevnih bakterija.Prašak kravlje žuči i natrijum tiosulfat uglavnom inhibiraju rast gram-pozitivnih bakterija.Pored toga, natrijum tiosulfat takođe obezbeđuje izvor sumpora.U prisustvu željeznog citrata, sumporovodik mogu detektovati bakterije.Ako postoje bakterije koje proizvode sumporovodik, na ploči će se stvoriti crni sediment;Indikatori TCBS medijuma su bromokrezol plavo i timol plavo, koji su indikatori kiselinske baze.Bromokrezol plavi je kiselinsko-bazni indikator s rasponom pH promjene od 3,8 (žuto) do 5,4 (plavo-zeleno).Postoje dva opsega promene boje: (1) kiselinski opseg je pH 1,2~2,8, menjajući se od žute do crvene;(2) Opseg alkalija je pH 8,0~9,6, mijenjajući se od žute do plave.

TSA sir soja pepton agar podloga:

Sastav TSA je sličan sastavu hranjivog agara.U nacionalnom standardu obično se koristi za testiranje bakterija koje se talože u čistim prostorijama (prostorima) farmaceutske industrije.Odaberite ispitnu tačku u području koje se testira, otvorite TSA ploču i postavite je na ispitnu tačku.Uzorci se uzimaju kada su izloženi zraku duže od 30 minuta u različito vrijeme, a zatim se uzgajaju za brojanje kolonija.Različiti nivoi čistoće zahtevaju različit broj kolonija.

Mueller Hinton agar:

MH medij je mikrobna podloga koja se koristi za otkrivanje rezistencije mikroorganizama na antibiotike.To je neselektivna podloga na kojoj može rasti većina mikroorganizama.Osim toga, škrob u sastojcima može apsorbirati toksine koje oslobađaju bakterije, tako da neće utjecati na rezultate djelovanja antibiotika.Sastav MH podloge je relativno labav, što pogoduje difuziji antibiotika, tako da može pokazati očiglednu zonu inhibicije rasta.U kineskoj zdravstvenoj industriji, MH medij se također koristi za test osjetljivosti na lijekove.Prilikom provođenja testa osjetljivosti na lijekove za neke posebne bakterije, kao što je Streptococcus pneumoniae, 5% ovčje krvi i NAD može se dodati u podlogu kako bi se zadovoljili različiti nutritivni zahtjevi.

SS agar:

SS agar se obično koristi za selektivnu izolaciju i kulturu Salmonella i Shigella.Inhibira gram-pozitivne bakterije, većinu koliforma i proteusa, ali ne utiče na rast salmonele;Natrijum tiosulfat i feri citrat se koriste za otkrivanje stvaranja sumporovodika, čineći centar kolonije crnim;Neutralna crvena je pH indikator.Kolonija fermentirajućeg šećera koja proizvodi kiselinu je crvena, a kolonija nefermentirajućeg šećera je bezbojna.Salmonela je bezbojna i prozirna kolonija sa ili bez crnog centra, a šigela je bezbojna i providna kolonija.